СОР № 1 Биология 9 класс Микробиология и биотехнология

Производство инсулина -. многостадийный процесс, включающий:

1) подготовку отрезка (вектора) ДНК, кодирующей молекулу инсулина;

2) выбор клеток, в ДНК которых будет интегрирован отрезок. Обычно это бактерии (Escherichia coli) или грибы (Saccharomyces cerevisiae или Pichia pastoris);

3) перенос векторной ДНК в генетический аппарат «хозяина»;

4) отбор клеток и выделение клеточной линии, содержащих рекомбинантную ДНК;

5) культивирование клеток в питательной среде, в которой нарабатываются продукты их жизнедеятельности, в том числе инсулин, закодированный векторной ДНК;

6) извлечение и очистку продукта от С-пептида (при использовании E. coli);

7) формирование вторичной структуры инсулина путем образования дисульфидных мостиков и отщепления ненужных аминокислотных последовательностей (при использовании E. coli,

при использовании грибов белок секретируется в питательную среду уже сформированным в нужную пространственную структуру);

8) очистку и концентрацию с использованием кристаллизации и хроматографии, лиофилизацию, изготовление лекарственной формы.